脑声常谈：动物模型构建与评估︱卒中后抑郁大鼠模型

卒中后抑郁（PSD）大鼠模型是研究人类卒中后抑郁疾病机制和治疗方法的重要工具。目前常用的造模方法是先通过手术诱导大鼠产生局灶性脑缺血，模拟卒中，再结合慢性应激刺激诱导抑郁样行为，从而构建PSD大鼠模型。多采用大脑中动脉闭塞（MCAO）法，通过线栓法或开颅电凝法阻断大鼠大脑中动脉血流，造成局部脑组织缺血梗死。如线栓法需将尼龙线插入大鼠颈内动脉，阻塞大脑中动脉起始部，缺血一定时间后拔出尼龙线实现再灌注，导致脑组织损伤。

线栓法制作PSD大鼠模型

通常选用健康的成年雄性或雌性大鼠，体重一般在250-300g左右。实验前需让大鼠适应性饲养1周左右，使其熟悉环境，减少应激反应对实验结果的影响。

使用合适的麻醉剂对大鼠进行全身麻醉，如戊巴比妥钠等，通过腹腔注射给药，剂量通常为40-50mg/kg。待大鼠麻醉后，将其仰卧固定在手术台上，确保头部固定稳定，便于手术操作。用碘伏对大鼠颈部皮肤进行消毒，然后沿颈部正中线做一纵行切口，长度约为2-3cm，小心分离皮下组织和肌肉，暴露右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。在手术显微镜下，使用显微镊和显微剪仔细分离右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。分离过程中要注意避免损伤血管周围的神经和组织，同时用生理盐水保持手术视野湿润。将颈外动脉分支及枕动脉用丝线结扎并剪断，以减少血液回流，便于后续尼龙线插入颈内动脉。在颈总动脉近心端用动脉夹暂时夹闭血流，然后在颈内动脉起始部剪一小口，将尼龙线经此小口缓慢插入颈内动脉，沿着颈内动脉向颅内方向推进，直至感觉到轻微阻力，此时尼龙线通常已阻塞大脑中动脉起始部，造成大脑中动脉血流阻断。保持尼龙线插入状态，使大脑中动脉缺血一定时间，一般缺血时间为60-120分钟，具体时间可根据实验需要进行调整。在缺血过程中，要密切观察大鼠的生命体征，如呼吸、心跳等，确保大鼠的安全。缺血时间结束后，小心拔出尼龙线，实现大脑中动脉的再灌注。松开颈总动脉上的动脉夹，恢复血液流通，可见血液重新充盈大脑中动脉及其分支。用生理盐水冲洗手术部位，清除血迹，然后对颈部肌肉和皮肤进行分层缝合，缝合过程中要注意对合整齐，避免感染。缝合完成后，用碘伏再次消毒伤口。

手术结束后，将大鼠放置在温暖、安静的环境中，待其自然苏醒。在苏醒过程中，可使用加热垫或保温灯对大鼠进行保温，防止其体温过低。术后给予大鼠适量的抗生素，如青霉素等，预防感染，剂量一般为20万-40万U/kg，每天1-2次，连续使用3-5天。密切观察大鼠的术后恢复情况，包括精神状态、饮食、饮水、活动能力等。定期测量大鼠的体重、体温等生理指标，如有异常及时处理。在脑缺血术后恢复一段时间，通常1-2周后，对大鼠进行慢性应激刺激，如给予禁食、禁水、昼夜颠倒、潮湿垫料、强迫游泳、悬尾等多种应激源，持续2-4周，使大鼠产生抑郁样行为。

一般行为评估：

大鼠一般情况观察 每日查看大鼠生命体征，观察精神状态、分泌物、皮肤及毛色、活动、摄食、进水量、二便等；对MCAO大鼠特别观察颈部切口，注意裂开、咬伤、感染等异常情况。

抑郁行为评估：

分别在实验第0、11、21天对大鼠进行称质量，记录大鼠体质量变化；强迫大鼠在水箱中游泳并记录大鼠在水箱中的不动时间；进行糖水消耗试验并记录大鼠的糖水消耗量；

行为学表现：PSD大鼠模型表现出与人类PSD相似的行为学特征，如在强迫游泳实验中，大鼠不动时间明显增加，反映出其绝望行为；在旷场实验中，大鼠的活动水平、探索行为减少，表明其兴趣缺乏和活动能力下降；在糖水偏好实验中，大鼠对糖水的偏好降低，提示其快感缺失。

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