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脑声常谈:动物抑郁行为实验手册丨新奇事物探索实验方法、指标评价及注意事项
新奇事物探索实验也叫新物体识别实验,是一种较新的评价抑郁症的典型症状:兴趣缺失的行为学方法。其主要是研 究动物对新奇事物的探索行为,是基于动物先天的 寻求新奇的行为,并用此来评价抑郁症模型是否存在兴趣缺失症状的方法,一般情况下抑郁症模型动物在新奇事物实验中的探索行为减少。1998年Harris 等通过对慢性不可预测性应激模型大鼠研究第一次将动物对新奇物体的探索行为作为评 价抑郁症动物模型兴趣缺失的评价指标。
实验材料
硬件:新奇事物探索实验可以分为大鼠和小鼠测试,其中小鼠建议的测试箱规格为40cm*40cm*40cm的透明箱体,大鼠规格建议为72cm*72cm*40cm的透明箱体。
软件:需要使用VisuTrack动物行为分析软件,自动跟踪实验动物的头部、重心及尾巴,考察动物头部接触物体的潜伏期、持续时间、接触次数等偏好指标。
实验方法
新奇事物探索实验分为适应期和测试期两个阶段,操作步骤如下 :
(1) 适应期:动物放入自发活动测试箱,适应5min后,取出,放回原笼;
(2) 测试期:在同一环境条件下引入一新物体 (应放入中心位置),再将待测动物面壁放入测试箱,开始实验;
(3) 检测时间应为10min。
评价指标
潜伏期( latency period): 实验开始至动物首次 主动探索(接触)物体的时间。如规定检测时间内,动物没有接触新物体,则潜伏期记录为检测时间。正常大鼠潜伏期多在130s 以内。
抑郁行为判断标准:与对照组相比有显著性增加(P0. 05)。(注:动物对新物体的探索标准:动物口鼻在新奇物体≤ 2cm范围内,直指向新奇物体或直接接触物体。
注意事项
所有行为学实验都要求周围安静,实验应在隔音,光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行。
实验前需要对实验动物每天抚摸1-2min以减少非特异性应激刺激对实验动物的影响;实验前需要提前至少3小时将动物带入实验室,降低动物对新环境的不安情绪。
实验过程尽量是同一个人在每天的同一个时段来做;若多个人多批动物重复一个实验更有说服力。
进行旷场检测时,需要对实验动物进行筛选,有些实验动物在水平方向或垂直方向的活动情况显著低于同批动物平均水平,则需要将这些动物预先剔除。
每次小鼠的放置位置尽量统一,背朝物体,且距两物体距离相等。
做下一只小鼠之前必须用酒精除去气味清洗实验设备,用卫生纸擦干净,保证不要留下排泄物和味道。
物体尽量为圆形较好,正方形或者长方形有四个角,动物可能会产生偏好。
NOR实验对动物各方面影响较小,而其他行为学实验(如强迫游泳、水迷宫、悬尾实验)对小动物影响较大,因此同一批动物进行不同行为学测试时,应先进行NOR实验。
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