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脑声常谈︱啮齿类动物冷热板测试方法总结
剧烈疼痛常难以控制,严重影响患者生活质量。在疼痛近几十年的研究历史中,科学家们一直致力于复制出更能反映人类疼痛特性的动物模型。这些动物模型部分再现了人类所表现的疼痛、痛觉过敏以及轻触、压觉等引起的疼痛反应等症状。这些动物模型的成功复制,是研究疼痛产生机制的基础,为人类认识疼痛的产生机制以及筛选更好的治疗药物提供了有效工具。
冷觉过敏症的检测是疼痛行为研究中一个非常重要的方法。冷热板测痛仪一款多功能的热疼痛阈值测试仪,适用于大鼠、小鼠麻醉、镇痛、神经性的药物筛选,为相关镇痛药物研究。在测试室中,将一只小鼠放在稳定在冰上4 °C的圆形有机玻璃板上五分钟。当小鼠接触到冷板时,会抬起爪子,抬起的次数将显示动物对冷刺激程度的反应,通过记录动物的反应时间(跳跃或舔脚表现)来评估它们对热或冷的疼痛反应。目前检测疼痛的冷板设备主要为冷热板测痛仪,可根据温度变化调节实现冷刺激或热刺激。
设备说明
镇痛仪基于金属板,可加热至55°C并冷却至-2°C(环境温度在20°C至25°C之间)。电子恒温器持板温,前面板数温度计见前板温度。冷热板设计为用非常简单,且速致温(自环境温度至4°C,至阈值不至10分钟,自4°C至55°C 5分钟)。量者,精于0.5°C。前面板计时器示物为反应所需秒数。该装置由一个圆柱形测试室组成,测试室位于一个 250 × 280 × 150 (mm) 的带盖有机玻璃板立方体箱中。盖子固定在测试室顶部,防止小鼠跳出。试验室底部的小孔用于融化的冰水流动。固定好冰块后,将一个2毫米厚的圆形有机玻璃板紧紧地放在小室的冰块上。使用表面温度传感器检测板的表面温度。将温度传感器放在平板表面后,可以在显示器上读取温度的变化。在冰上放置 5 分钟后,平板温度稳定在 4 ℃。为了测试小鼠的冷感觉过敏症,将小鼠放在冰板上,计算小鼠抬起的频率和时间,以评估小鼠的冷感觉过敏症。
- 大小鼠冷热板测痛仪,型号:XR1100,上海欣软 -
为了评估这种方法,比较常用于测试三种常用的小鼠疼痛模型:福尔马林试验和慢性收缩性损伤(CCI)等。当冷热板测痛仪板面温度设定为4℃时,对造成坐骨神经病理性疼痛模型的动物,受试药物能很明显地改变其在冷板上的抬足时间和次数,当板面温度设定为55℃时,对动物的生理性痛阈的高低能进行准确的测量,以此判定受试药物的镇痛类型和效果。为了评估小鼠对有害冷的反应,将小鼠放在有机玻璃室中的冷热板仪器上,板温设定为0 °C,并录像3分钟。
程序说明
在冷板试验中,啮齿动物爪子的收缩被视为刺激反应。该试验有助于了解冷异感和痛觉减退。冷板温度设定为 5°C。截止潜伏期为 30 秒。冷板温度设定为 5°C。截止潜伏期为30秒。将大鼠放入冷板装置到反应(抬起后爪)之间的时间记录为30秒,后爪)之间的时间进行记录。在大鼠组中,测量第一次收回后爪的反应。在暴露于CCI的大鼠组中,受伤的后爪在所有情况下都是最先做出反应的。冷板的温度保持5∘C ,截止潜伏期为将大鼠放在冷板上,记录大鼠抬起后爪的时间。记录后爪抬起的时间。在每种情况下,受伤的爪子都是最先做出反应的。动物被带离笼子,以减少疼痛刺激。
程序步骤
建议先让动物适应测试室。
使用前,用认可的消毒剂清洁冷盘表面。
将冷盘表面冷却至实验测试所需温度范围。
将动物放入测试仪器,动物的一般活动受到限制,但动物不受约束。
记录动物出现爪缩、抖动或跳跃(较少见)等痛觉反应的潜伏期并记录。一旦观察到这种反应,立即将动物移走。
如果在20秒内没有反应,则将动物从仪器上移开。
动物在无拘束状态下进行测试,能够准确反映动物的痛觉行为,可对动物行为的潜伏期和固定时间内舔足次数进行准确统计;
- 结果示意图 -
参考文献
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