脑声常谈：大小鼠倒置网格实验测试方法及注意事项

小鼠在生物医学研究中发挥着越来越重要的作用，它们可用于模拟许多人类运动障碍，包括躯体和中枢神经系统疾病，前者包括三十多种遗传性肌营养不良症1和重症肌无力，而后者包括多发性硬化症、脊髓性肌萎缩症、帕金森病、亨廷顿病和肌萎缩侧索硬化症。对于所有这些模型，对其运动缺陷的全面评估必须包括具体的力量测试。倒置网格实验(Inverted screen test)动物在一个倒置的网格上抓握和移动的能力，评估其上肢力量和运动协调能力。实验记录动物在倒置网格上的表现和时间。这是一项使用所有四个肢体的肌肉力量测试。大多数正常小鼠很容易在这项任务中获得最高分，用于评估肌肉导致不活动之前的耐力或肌肉疲劳。

Fig1 倒置筛网

倒置筛网是一个43厘米见方的金属丝网，由1毫米直径的12毫米见方的金属丝组成。它周围有4厘米深的木珠（可以防止偶尔鼠试图爬到另一边）。

Fig2 倒置网格实验示例

权重测试

该装置由七个重物组成。每个都由一团缠结的细规格不锈钢丝组成，这是一个“水垢收集器”，用于防止家用水壶中形成石灰石水垢。它的重量很小（7克），但每个秤收集器都连接到一系列钢链节上，每个钢链节重约13克。链接数量从1到7不等。因此，它们的重量为：20、33、46、59、72、85和98克。

测试程序

对于所有测试，在测试前5-20分钟将小鼠带到实验室，为了恢复肌肉力量并恢复到正常的唤醒水平，每次运动测试后将小鼠返回到笼子中休息。

步骤：将鼠置于丝网屏幕中央，启动秒表，将屏幕旋转至倒置位置2秒以上，小鼠头部先下垂。将屏幕稳定地固定在距衬垫表面40-50厘米的位置。记下鼠掉落的时间，或在达到60秒标准时间时将其移开。使用的装置是一个线栅（线直径2mm），周围环绕通过一个小木框。将小鼠放在网格上，倒置并放置在衬垫表面上方50厘米处。四小鼠在同一房间内同时进行测试。期间测试中，鼠被分开，这样它们就看不到对方了。最长悬挂时间设置为20分钟。如果20分钟内鼠掉下来，休息300秒后进行第二次试验。测试后立即对小鼠称重。时间直到跌倒是通过视频记录来评分的。跌倒前的最长时间(s)和“持有冲动”被用作指标。保持脉冲是一种校正变化的输出度量体重，乘以体重（g）计算直到跌倒的最长时间（s）。

较长的标准时间可能对某些实验有用。

评分：

下降1-10秒=1

下降11-25秒=2

下降26-60秒=3

60秒后跌倒=4

或者，例如2分钟：

下降1-10秒=1

下降11-25秒=2

下降26-60秒=3

下降61-90秒=4

90秒后跌倒=5

重量测试

握住小鼠尾巴的中部/底部并将其放低，使其抓住实验室工作台上的第一个重量（20克）。当它用前爪抓住线秤收集器时，启动停止时钟并抬起鼠，直到连杆脱离工作台。保持三秒是标准。如果鼠在不到3秒的时间内放下重物，请记下其保持重物的时间。让鼠休息约10秒，然后再次尝试重物。如果三次失败，则终止试验，并为小鼠分配达到的最大时间/重量。如果它能保持3秒，则尝试下一个最重的重量。如果它能举起这个物体3秒，在用第一个重量测试完所有笼子成员后，用下一个更重的重量测试它。同样，它有3次机会保持重量3秒。最终总分的计算方法为最重链中保持完整3秒的链接数量乘以保持时间（秒）。如果最重的重量在3秒之前掉落，则会计算适当的中间值。因此，一只小鼠持有5连杆重物3秒，但无法举起6连杆重物，其得分为(5x3)=15。如果它持有6连杆重物1秒，则得分(5x3)+(1)=16。

小鼠在体重测试中的表现与C57BL/6小鼠相似，雌性C57BL/6小鼠得分约为15，129只小鼠得分为17，这意味着它们可以举起大约5个链节，约70克。通常，C57BL/6小鼠可举起2-3个链节（得分6-9、33-46g）。这些差异可能与小鼠接受的处理程度以及实验者技术的细节等因素有关。

有时小鼠可能没有足够的动力去抓握装置，这通常发生在老年动物身上。通过将小鼠置于钢丝球的抓握距离内之前长时间握住小鼠的尾巴，可以最大限度地减少这个问题。海马损伤不会影响通过重量测试或倒置屏幕测量的力量。感染朊病毒（痒病）的小鼠在感染后18周时在倒置屏幕上的表现受到损害。

找实验方法，上脑声常谈。